顾棠的实验中心点是hotair,那么下一步就是要确定上游以及下游的关键性因子。
相对来说研究下游比较容易,那么第一个实验就是用探针标记hotair,然后看它在细胞内的富集和定位,之后上gstpull-down,找到跟它结合的蛋白,通过ip跟s_spectru等等技术确定候选靶点,再回去验证。
中间还得用到knockdown、knockout和overexpression等等技术,好在顾棠研究生做得就是rnai,这个对她来说相对容易。
总之顾棠是在第一年的圣诞节附近正式开始实验的,等到来年的春天,她才刚刚确定了这一通路在hepg2细胞中的两个因子。
不过因为整个研究路线和流程已经很是熟悉了,所以后头的实验会越来越快的。
她跟哈德利教授汇报的时候,教授还专门提醒了她注意保密,研究出通路上一个新的因子并且确定调控关系非常难,但是验证已经研究出来的东西就很容易了。
哈德利教授道“学校有一门论文写作课程,你抽空可以去上一上了,你做得是开创性的研究,我不希望最后因为论文写作的关系被杂志社打回来——”
他微微一顿,笑了起来,“不过如果你的实验真的成功,我想他们会请所有的编辑帮你润色论文的。你知道的,什么拼写错误,语法错误等等他们都会帮你改,只要数据没有问题就可以了。”
顾棠过年没回去,到了三月份,很久没联络的王晓凡给她发了消息,“公司关门了。”
她离开之后,跟原公司的人基本就不太来往了,也就是逢年过节发个群发的祝福短信的关系。
不过这消息来得挺好,顾棠正在等pcr扩增序列,好进行下一步实验,连续高强度的研究工作,人是需要换换脑子的,正好借这个机会放松一下。
她很快回了消息,“???上次不是说很顺利?新来的硕士对发酵很有研究?”
王晓凡“没错,他提议换了半固体发酵之后,产量的确上去了,但是问题是没有效果……上动物基本没有效果。”
顾棠“没切信号肽?”
王晓凡“不知道。他们开会讨论可能没有正确折叠成活性结构,说要换宿主细胞,但是时间不够了。真的是说关门就关门!上周五还在做实验,这周三就结束了?我现在都没缓过劲儿来!”
顾棠“没做个晶体衍射看看结构?”
王晓凡“这个我不太懂,但是我听说好像是纯度不够,没法结晶。”
顾棠“我走的时候齐总不是说要换sf-9,换了吗?”
王晓凡“没。根本没时间。你走了之后,新硕士来了带着我们发酵,研究细胞株的就剩乐威一个人了。他还得给我们提供中子,他哪里来的时间?他才做到表达gfp,有次开会新硕士希望他抓紧,齐总也说别的研究性工作先放一放,后头就再没做了。”
算算时间,顾棠是去年四月份底走的,到现在正好十个月,上一个表达系统加上前期工作,构建了整整两年多。
现在十个月就想换个系统,还是抽时间做,对抗体表达来说的确是强人所难。
顾棠“那你找了新工作吗?不如休息两个月?”
王晓凡“嘻嘻嘻嘻,发了六个月的补偿款,我打算出去旅游一下,然后再找工作,不过得抓紧一点了,六月新生毕业,到时候可能就不太好找了。”
顾棠“你怕什么?你有经验了,会做细胞株,会做发酵,抗体还是大热门的领域,不用担心。”
王晓凡“还是你会说话。咱们公司不是逸源投创投资的吗?风投说可以帮我们在内部推荐就业。据说逸源一共投了14家公司。”